Test sekrece - Secretion assay

Sekreční test je proces používaný v buněčné biologii k identifikaci buněk, které vylučují určitý protein (obvykle cytokin ). Poprvé byl vyvinut Manz et al. v roce 1995.

Buňka, která sekretuje požadovaný protein, se obvykle izoluje pomocí komplexu protilátka-protilátka, který obalí buňku a je schopen "zachytit" vylučované molekuly. Buňka je poté detekována jinou protilátkou značenou fluorochromem a následně je extrahována pomocí procesu nazývaného fluorescenčně aktivované třídění buněk (FACS). Metoda FACS je široce podobná formátu protilátky s enzymem vázaným imunosorbentovým testem ( ELISA ), kromě toho, že zapouzdřené buňky zůstávají nedotčené. To je výhodné, protože buňky po extrakci stále žijí.

Další pokroky nyní znamenají, že je možné extrahovat sekreční buňky pomocí separačního systému na magnetické bázi nebo pomocí průtokového cytometru .

Pro sekreční test existuje řada komerčních aplikací. Jedním z takových příkladů je technologie Gel Microdrop (GMD) vyvinutá společností One Cell Systems . Jedna buňka tvrdí, že GMD typicky obnovuje vyšší počet životaschopných sekrečních buněk než jiné metody, přičemž ignoruje všechny buňky, které nevylučují požadovaný protein.

Reference

  • Manz, Rudolf; a kol. (Březen 1995). „Analýza a třídění živých buněk podle vylučovaných molekul, přemístěných do afinitní matrice buněčného povrchu“ . Sborník Národní akademie věd . 92 (6): 1921–1925. Bibcode : 1995PNAS ... 92,1921M . doi : 10,1073/pnas.92.6.1921 . PMC  42394 . PMID  7892200 .

Další čtení

externí odkazy