Kyveta - Cuvette
Kyveta ( francouzsky : kyvety = „malá nádoba“), je malá trubkový zásobník s rovnými stranami a kruhového nebo čtvercového průřezu. Je utěsněn na jednom konci a je vyroben z čirého, průhledného materiálu, jako je plast , sklo nebo tavený křemen . Kyvety jsou navrženy tak, aby vzorky platit pro spektroskopické měření, kde světelný paprsek prochází vzorkem do kyvety pro měření absorbance , propustnost , fluorescenční intenzitu, fluorescenční polarizace , nebo fluorescenční životnost vzorku. Toto měření se provádí spektrofotometrem .
Přehled
Tradiční ultrafialová -viditelná spektroskopie nebo fluorescenční spektroskopie používá vzorky, které jsou kapalné. Vzorek je často roztok , ve kterém je rozpuštěna sledovaná látka. Vzorek se umístí do kyvety a kyveta se umístí do spektrofotometru pro testování. Kyveta může být vyrobena z jakéhokoli materiálu, který je průhledný v rozsahu vlnových délek použitých v testu.
Nejmenší kyvety pojmou 70 mikrolitrů, zatímco největší pojmou 2,5 mililitru nebo více. Šířka určuje délku dráhy světla skrz vzorek, což ovlivňuje výpočet hodnoty absorbance. Mnoho kyvet má světelnou dráhu 10 mm (0,39 palce), což zjednodušuje výpočet koeficientu absorpce . Většina kyvet má dvě průhledné strany proti sobě, takže světlo spektrofotometru může projít, i když některé testy používají odraz, takže potřebují pouze jednu průhlednou stranu. Pro fluorescenční měření jsou pro excitační světlo zapotřebí další dvě průhledné strany, v pravém úhlu k stranám použitým pro světlo spektrofotometru. Některé kyvety mají skleněný nebo plastový uzávěr pro použití s nebezpečnými roztoky nebo pro ochranu vzorků před vzduchem.
Technika
Škrábance na bocích kyvety, které světlo prochází rozptylovým světlem a způsobují chyby. Gumový nebo plastový stojan chrání kyvetu před náhodným zasažením a poškrábáním skříní stroje. Měření může ovlivnit také rozpouštědlo a teplota. Kyvety používané v experimentech s kruhovým dichroismem by nikdy neměly být mechanicky namáhány, protože napětí způsobí dvojlom v křemeni a ovlivní měření.
Otisky prstů a kapičky vody narušují světelné paprsky během měření, proto lze před použitím použít k otření vnějšího povrchu kyvety gázu nebo hadřík. Papírový ručník nebo podobný předmět může kyvetu poškrábat. Lze použít jemný čisticí prostředek nebo ethanol a následně opláchnout vodou z vodovodu. Kvůli korozivním účinkům na sklo se vyhýbají kyselinám a zásadám a při práci s plastovými kyvetami není vhodný aceton . Pokud je roztok přenesen do kyvety pomocí Pasteurovy pipety obsahující vzduch, mohou se uvnitř kyvety tvořit bubliny, které snižují čistotu roztoku a rozptylují světelné paprsky. K odstranění bublin se používá prstová metoda. Roztok obsažený v kyvetě by měl být dostatečně vysoký, aby byl v cestě světelnému zdroji. V případě, že vzorek vyžaduje inkubaci při vysoké teplotě, je třeba dbát na to, aby se zabránilo příliš vysokým teplotám pro kyvetu.
Typy
Historicky byly pro měření v ultrafialovém rozsahu vyžadovány opakovaně použitelné křemenné kyvety , protože sklo a většina plastů absorbuje ultrafialové světlo a vytváří interference. Dnes existují jednorázové plastové kyvety vyrobené ze speciálních plastů, které jsou průhledné pro ultrafialové světlo. Skleněné, plastové a křemenné kyvety jsou vhodné pro měření prováděná na delších vlnových délkách, například v oblasti viditelného světla .
„Tandemové kyvety“ mají skleněné bariérové médium, které se rozprostírá ze dvou třetin uprostřed, takže měření lze provádět se dvěma roztoky oddělenými a znovu, když jsou smíchány.
Plastický
Plastové kyvety se často používají v rychlých spektroskopických testech , kde je vysoká rychlost důležitější než vysoká přesnost. Plastové kyvety s použitelným rozsahem vlnových délek 380–780 nm (viditelné spektrum) lze po použití zlikvidovat, aby se zabránilo opětovnému použití kontaminace. Jsou levné na výrobu a nákup. Jednorázové kyvety lze použít v některých laboratořích, kde paprskové světlo není dostatečně vysoké, aby ovlivnilo toleranci absorpce a konzistenci hodnoty.
K výrobě plastových kyvet se nejčastěji používá materiál Polymethylmethacrylate (PMMA) a Polystyrene (PS).
Sklenka
Korunní sklo má optimální rozsah vlnových délek 340–2500 nm. Skleněné kyvety se obvykle používají v rozsahu vlnových délek viditelného světla, zatímco tavený křemen se obvykle používá pro ultrafialové aplikace.
Křemen
Křemenné články poskytují větší odolnost než plast nebo sklo. Křemen vyniká přenosem ultrafialového světla a lze jej použít pro vlnové délky od 190 do 2500 nm.
Tavený křemen
Fúzované křemenné buňky se používají pro vlnové délky pod 380 nm, tj. Ultrafialové světlo .
Infračervený křemen
IR křemen má použitelný rozsah vlnových délek 220 až 3 500 nm. Je odolnější vůči chemickému napadení roztokem vzorku než jiné typy určené pro fluorescenční měření.
Safír
Safírové kyvety jsou nejdražší, přestože poskytují nejtrvanlivější, odolnější proti poškrábání a přenosný materiál. Přenos sahá od ultrafialového světla do středního infračerveného záření v rozmezí od 250 do 5 000 nm. Sapphire dokáže odolat extrémním přirozeným podmínkám některých roztoků vzorků a teplotním výkyvům.
Dějiny
V roce 1934 vytvořil James Franklin Hyde kombinovanou křemičitou komoru, která byla prosta dalších cizích prvků, jako zkapalňovací techniku jiných sklářských výrobků. V 50. letech společnost Starna Ltd. vylepšila metodu úplného roztavení segmentu skla pomocí tepla, aniž by došlo k deformaci jeho tvaru. Tato inovace změnila výrobu inertních kyvet bez termosetové pryskyřice. Před vytvořením obdélníkové kyvety byly použity běžné zkumavky. Jako inovace motivované změny v technice byly kyvety konstruovány tak, aby měly ohniska nad běžnými zkumavkami.
Další obrázky
S kyvetou použitý spektrofotometr UV-VIS
Směřuje čistou stranou kyvety ke zdroji světla
Viz také
Reference
- ^ Perkin Elmer Inc. (2006). „Úvod do fluorescenční spektroskopie“. Spektroskopie - získaná 15. srpna 2013.
- ^ "Čištění a správné použití kyvet pro Spec 20" . chemed.chem.purdue.edu . 17. 3. 2016
- ^ „Kyveta“ . chemed.chem.purdue.edu . Citováno 2016-03-17 .
- ^ Choudhary, Ankur (2011-09-27). „Manipulace, čištění a skladování kyvet spektrofotometru“ . www.pharmaguideline.com . Citováno 2017-06-19 .
- ^ Cirkulární dichroismus (CD) spektroskopie . Applied Photophysics Ltd., 2011. Citováno 15. srpna 2013.
- ^ Weisstein, Eric W. „Dvojlom“ . scienceworld.wolfram.com , Wolfram Research, 1996–2007. Citováno 15. srpna 2013.
- ^ „Co je to kyveta? - Jak kyvetu používat“ . www.cmscientific.com . Citováno 2017-06-19 .
- ^ „Průvodce jednorázovými kyvetami“ . Kyvetový obchod FireflySci . Citováno 2017-06-21 .
- ^ a b „Jak vybrat kyvety pro měření UV VIS a průvodce materiálem kyvety“ . Kyvetový obchod FireflySci . Citováno 2017-06-21 .
- ^ Architekti, Active Media. „FireflySci“ . www.precisioncells.com . Citováno 2017-06-23 .
- ^ "Specifikace kyvety. Přenosové spektrum. Spektrofotometrické buňky" . křemenná kyveta . Citováno 2017-06-21 .